マウス詳細データ: 4C30マウス

シアル酸転移酵素を導入したトランスジェニックマウスのラインの一つで、通称4C30と呼んでいる。ホモ導入個体は7ヶ月程度で心拡大を伴う呼吸不全で全例死亡する (Suzuki et al., 2011; 野口ら、2003)。心臓の症状から、このマウスは拡張型心筋症モデルマウスとしての可能性を示唆しており、現在、基礎データを採取中である。

心臓の様子

ホルマリンカルノア混合液による拡張固定後の胸腔内の心臓を示す (胸腔内の心臓の拡大図)。左が発症例、右が正常対照例である。発症例は対照に比べ心臓全体が著しく大きく、この図を用いていわゆる心胸郭比を計測すると、対照例が41%に対し、発症例では59%で、18%の増加が見られる。中段は摘出心の様子で、発症例では左右の心耳が共に著しく大きい。心/体重比は発症例が1.3 ± 0.3%で対照例の0.7 ± 0.1%に比べ、有意に高い。下段は四腔断面の写真で、発症例では心室筋の壁厚が右室、室中隔、左室のいずれも対照例に比べ菲薄化 (ひはくか) が見られる。左右の心房筋も同様に菲薄化している。

導入遺伝子と挿入部位

4C30マウスは、pCAGGSベクター (Niwaet al., 1991) の発現カセットにマウス由来β-galactoside α-2,3-sialyltransferase 2遺伝子 (ST3GalIIまたはSiat5; Leeet al., 1994; Konoet al., 1997) のcDNAを挿入したものを、C57BL/6CrSlcマウスの前核期胚の前核へ注入することにより作製したものののうちの一ラインである。

1. Suzuki O, Kanai T, Nishikawa T, Yamamoto Y, Noguchi A, Takimoto K, Koura M, Noguchi Y, Uchio-Yamada K, Tsuji S, and Matsuda J. (2011) Adult onset cardiac dilatation in a transgenic mouse line with Galβ1,3GalNAc α2,3-sialyltransferase II (ST3Gal-II) transgenes: a new model for dilated cardiomyopathy. Proc. Jpn. Acad., Ser. B, Phys. Biol. Sci. 87(8):550-62. [PMID:21986317]
2. Nagai-Okatani C, Nishigori M, Sato T, Minamino N, Kaji H, and Kuno A. (2019) Wisteria floribunda agglutinin staining for the quantitative assessment of cardiac fibrogenic activity in a mouse model of dilated cardiomyopathy. Lab. Invest. 99(11):1749-1765. [PMID:31253865]
3. 野口 章，鈴木 治，小浦美奈子，高野 薫，野口洋子，山本美江，松田潤一郎 (2003)「シアル酸転移酵素遺伝子ホモ導入マウスに見られた拡張型心筋症」，日本疾患モデル学会記録 19:31-37, 2003.
4. Niwa H, Yamamura K, and Miyazaki J. (1991) Efficient selection for high-expression transfectants with a novel eukaryotic vector. Gene 108(2):193-9. [PMID:1660837]
5. Lee YC, Kojima N, Wada E, Kurosawa N, Nakaoka T, Hamamoto T, and Tsuji S. (1994) Cloning and expression of cDNA for a new type of Galβ1,3GalNAc α2,3-sialyltransferase. J. Biol. Chem. 269(13):10028-33. [PMID:8144500]
6. Kono M, Ohyama Y, Lee YC, Hamamoto T, Kojima N, and Tsuji S. (1997) Mouse β-galactoside α2,3-sialyltransferases: comparison of in vitro substrate specificities and tissue specific expression. Glycobiology 7(4):469-79. [PMID:9184827]

近傍プライマーを用いたPCR法により、ホモ導入個体、ヘミ導入個体、野生型個体を区別することができる。具体的には以下の３つのプライマーを同時に使用し、 Tg由来の175bpバンド (+バンド) と野生型由来の228bpバンド (−バンド) の出方により、遺伝子型を判別する (この方法の詳細はトランスジェニック動物のgenotypingのページをご参照ください)。

• 4C30-S770: TGGACAAGACATGGGCATTGCCAGA
• 4C30-R998: ACATGTAACAGGATTTGGCACAGCG
• pCAG-R109: GGCGGGCCATTTACCGTAAGTTATG